在我们关于单克隆抗体（mAb）聚集的本篇文章中，我们收集了一些关于单克隆抗体如何聚集以及在什么条件下聚集的细节。我们希望这些事实对关注聚集体形成的科学家有所帮助。

1.单抗聚集可由内在和外在因素引起。内在因素是与特定蛋白质序列和结构或化学和物理性质相关的因素。外在因素是指蛋白质处理、加工或储存过程中产生的因素.

2.不正确或非天然折叠的蛋白质可暴露疏水区域，从而促进聚集。1,2

3.在细胞培养中，由于蛋白质浓度高、温度高、培养基成分或由于氧化环境不足而形成不完全的二硫键，可能会发生不正确的折叠。2

4.某些金属离子（如铜和铁）的存在会影响二硫键的形成。1根据具体情况，结果可以是正面的，也可以是负面的.

5.离心、微滤或搅拌过程中的剪切应力可导致聚集。2.

6.低pH值可引起结构和物理化学性质的变化，从而导致聚集。涉及潜在危险的低pH值的常见纯化过程是蛋白质A洗脱和病毒失活步骤。2在这些步骤中，有时使用尿素、甘油、蔗糖或精氨酸等添加剂来防止聚集。1.

7.当蛋白质浓度较高时，表面活性剂添加剂有时用于防止聚集。1.

8.与低离子强度相比，高离子强度下的聚集发生得更快。2.

9.已经发现谷氨酰胺、天冬酰胺、疏水或芳香残基含量高的氨基酸序列容易聚集。1.

10.高电荷残基（如天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸）的序列不太可能聚集。1.

11.结合洗脱阳离子交换色谱法（CEX）和疏水作用色谱法（HIC）是去除聚集物的常用方法。3然而，洗脱期间的高蛋白质和盐浓度可能导致聚集。4.

12.上柱后聚合也是可能的。这可能是由于结合期间的构象变化、单克隆抗体与色谱介质之间的相互作用或单克隆抗体之间的自结合。介质的性质，如配体结构、配体间隔基、配体密度、孔径和孔径都会影响柱状聚集体的形成。4.

高速膜色谱法的一个优点是缩短停留时间可以减少柱上聚集。Purilogics的多维阴

离子交换膜PurexaTM MQ是去除聚集物的有力工具，因为它是同时基于电荷和疏水相互作用来进行分离。Purexa MQ已被证明能有效去除商品化生产中mAb  Feed中的聚集体。5.

注意：Purilogics Purexa MQ能够显著移除聚合体。请阅读我们报道案例研究的两篇相关文章。https://www.purilogics.com/feed/2020/11/17/polishing-step-purification-of-mabs-using-purexa-mq-multimodal-anion-exchange-membrane-chromatography-columns-part-1-hcp-and-aggregate-removal-from-an-acidic-mab-feed.

参考文献：

1. Zang, L.; Yi, Y. Factors Influencing Biotherapeutic Monoclonal Antibody Aggregation, American Pharmaceutical Review (2018).

2. Joshi, V.; Yadav, N.; Rathore, R. S. Aggregation of Monoclonal Antibody Products: Formation and Removal, BioPharm International, 26, 3 (2013). 

3. Evans, W. Removing Aggregates in Monoclonal Antibody Purification, Pharmaceutical Technology, 39, 3 (2015).

4. Carta, G.; Khandelwal, P.; Snyder, M. Minimizing On-Column Monoclonal Antibody Aggregate Formation. Bioradiations (2018).

5. Forsythe, A.; Henn, D.; Temples, G.; Zhou, J.; Husson, S.M. Application of novel multimodal anion-exchange membrane chromatography columns in a two-step mAb purification scheme – Aggregates and HCP removal. 257th ACS National Meeting, Orlando, FL (2019).