对流VS扩散
想象下现在有一个盛有糖的杯子,在加入水后,静置。最终,几个小时候后,糖会都溶于水中。这就是一个扩散为主要过程的例子。另一方面,如果搅拌糖和水,糖会在几分钟内溶解。这是一个以对流为主要过程的例子.通过这样的两个例
Resin vs. Membrane Chromatography
在过去的几十年,以多孔树脂为基质的色谱层析柱,一直是生物纯化的主流。中间的多孔通道给生物大分子提供了一个很大的,特别的区域来进行结合。然而,目标分子需要通过扩散机理来通过这个通道从而到达特殊的结合区域。因此,基于树脂机理的层析柱往往保留时间都很长,从而影响了生物制品的产率。此外,树脂 层析柱的孔径往往小于100nm。因此,产率的问题往往在纯化更大的分子的时候显得更为突出,比如mRNA,质粒DNA,AAV和LV(慢病毒)。
相反的,膜中的直接流通孔允许在用对流为主要机理进行纯化。由于这种设计的优点,膜纯化的保留时间很短.此外,在纯化极大的生物分子的时候,也只有很小的体积排阻效应。由于孔径是在100nm到几个微米之间,,对于基因治疗类的产品,相较于树脂基质色谱柱, 膜纯化可以有很高的结合能力和流速。
Size Comparison: Biologics vs. Pores
不同于树脂基质的纯化产品,直-通模式的膜纯化产品适合很大分子量范围的生物制品。例如,一个常用的树脂色谱产品的孔径大小是在亚100nm范围。在纯化质粒DNA的时候,生物制品的大小通常是在150到300nm,树脂小的孔径常常无法让大分子大量结合。另一方面,Purexa™产品的孔径大小往往在0.3-5um,由于孔径变大,往往目标分子不管分子多大,都能够有很高的结合能力。因此,Purexa™的膜色谱产品往往可以用来纯化多个不同大小的生物分子,同时还保证了很高的流速和很高的结合能力。
Purilogics的膜色谱可以用来纯化以下类型的生物制品(不仅限于):
1.单克隆抗体
2.mRNA
3.AAV(腺病毒)
4. LV(慢病毒)
5.质粒DNA
6. 寡核苷酸片段,核苷酸/核苷