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应用谱图

如何纯化mRNA-不同大小的mRNA分子的不同策略

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更新时间:2024-07-17 16:55:00
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关键字:Purilogics点击下载文件介绍


在过去的2年中,由于FDA批准了两款创新型mRNA的新冠疫苗,mRNA类型的药物吸引了很多人的兴趣。随着对mRNA药物开发热情的高涨,制药公司对于如何提升下游的纯化能力,从而提升产率的需求也越来越高。


mRNA由于核苷酸数量的多寡,其分子大小区别很大。例如,GFP蛋白就是有300-1000个核苷的分子量大小。相反的,mRNA分子比如新冠mRNA疫苗和Cas-9就是在2000-4000个核苷大小。甚至更大,如SAM-RNA就拥有10,000个核苷。从这些例子中可以看出来,mRNA的分子量区别很大。

mRNA 分子大小对树脂色谱纯化的影响 

目前,领先的色谱纯化产品均采用了树脂来作为基质,而常用的树脂产品往往由于有死孔所以往往对纯化的目标分子有分子量限制。因此,往往树脂产品仅仅能纯化很少一部分分子量的mRNA分子,而且结合能力有限。往往超过这个分子量范围的mRNA分子都无法进行纯化。我们测试了很多的mRNA分子并做了以下的表格供您参考。从表中可以看出,如果mRNA的分子量变大,那么树脂的结合能力会下降的很快。

 Figure 1: mRNA binding capacity


解决方案:膜色谱

Purilogics,目前可以提供一种创新型的mRNA亲和色谱产品-Purexa™-OdT。由于具有大的,开放式的,直通的孔,不同大小的mRNA将会在IVT feed后和我们的膜有效的结合。如图1中所示,相比于树脂色谱产品,Purexa™-OdT显示了更高和更持久的DBC数值,而且保留时间仅需数秒。因此,用Purexa™-OdT来纯化mRNA,可能您只需数分钟,而不是几个小时,即可完成。