在我们最初的回顾之后，我们进一步探索了IVT对mRNA生产的影响。以下是我们的调查结果：

1.为了应对在早期研究中,触发先天性免疫反应的IVT mRNA，各公司已经开发出各种化学修饰，例如假尿苷修饰.

2.单链合成mRNA末端的5'端帽起到防止核酸外切酶的作用，并通过与真核翻译起始因子4E结合从而促进翻译起始.

3.在链（3'）的另一端，有一个Poly A的尾巴，在与Poly A结合蛋白（PABP）结合后参与翻译的起始步骤；尾巴的长度对稳定性有显著影响.

4.IVT后，DNA酶消化原始DNA模板，并用热敏磷酸酶去除mRNA上的5'三磷酸基。去除这种三磷酸基团会降低潜在的免疫反应.

5.对于合成mRNA的纯化，大多数商业纯化试剂盒都基于多核苷酸与膜或磁珠的选择性结合：例如我们的OdT膜.

6.此外，高效液相色谱法可用于通过尺寸排阻法或离子交换法进行纯化。但是有效性不高且难以放大到生产.

7.未纯化的mRNA将会导致相对较低的翻译效率和较高水平的细胞因子分泌.e而这些说明了纯化是mRNA生产过程的关键步骤.

8.目前还没有标准化的IVT过程，这在mRNA生产领域是一个重大挑战.因为这限制了单个mRNA纯化平台的开发.

9.mRNA是一种大而不稳定的分子，对压力和酶降解非常敏感.这使得了生产过程变得极为微妙.

Purilogics提供膜色谱产品，以简化和加快您的mRNA纯化过程。我们的OdT膜产品在高流速下对各种大小的mRNA均有很好结合能力.目前世界领先的mRNA公司均在使用我们的产品.

参考文献

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